除少數(shù)培育基只需加熱溶解,，不需高壓滅菌外，大部分培育基均需121℃高壓滅菌15-30分鐘,。尤其是對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培育基滅菌不完全,，直接關(guān)系到試驗(yàn)成果。因而有必要認(rèn)真對(duì)高壓滅菌器進(jìn)行滅菌作用的驗(yàn)證,。  1．試驗(yàn)資料 

(1) 嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片,。嗜熱脂肪芽胞桿菌(Bacillus  stearothermophilus) ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-l05 CFU/片,。 (2) 121℃壓力蒸氣滅菌化學(xué)指示卡,。 

(3) 溴甲酚紫胨水培育基116℃高壓滅菌20分鐘后備用,。 (4) 0-150℃留點(diǎn)溫度計(jì),。 2．辦法與成果 

將嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片（以下簡(jiǎn)稱(chēng)菌片）用無(wú)菌鑷子放人密封試管中?；瘜W(xué)指示卡和留點(diǎn)溫度計(jì)放入敞口試管中,。以上兩種試管各預(yù)備5-10份。別離放置在高壓滅菌器蒸氣口處,、底部排氣口處及底部出水口處或上下左右中心5處,。如滅菌器為二層，則需放10處,。 

留點(diǎn)溫度計(jì)標(biāo)化合格后方可用于驗(yàn)證試驗(yàn),。檢測(cè)前，需將溫度計(jì)的水銀柱甩**40℃以下,。每次監(jiān)測(cè)后留點(diǎn)溫度計(jì)的溫差應(yīng)存1℃之間,，則闡明滅菌器內(nèi)的溫度散布是均勻的,。 

滅菌后的菌片應(yīng)在嚴(yán)格無(wú)菌操作條件下放入滅菌后的溴甲酚紫胨水培育基內(nèi)56-60℃培育24-48小時(shí)，調(diào)查色彩改變,。如培育基變?yōu)辄S色,，闡明菌片中的嗜熱脂肪芽胞桿菌尚未完全滅活，細(xì)菌仍可在培育基中成長(zhǎng),，分化葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色,。如培育基色彩不改變?nèi)詾樽仙瑒t闡明芽胞已滅活,。同時(shí)要用未經(jīng)滅菌的紙片放入培育基內(nèi)作為陽(yáng)性對(duì)照,，不加紙片的空白培育基作為陰性對(duì)照。 

化學(xué)指示卡上的指示色塊,，在高壓蒸氣滅菌時(shí),，由淡黃色變?yōu)楹谏８矢淖兊纳顪\,，并與對(duì)照色比較,，可判別滅菌作用是否到達(dá)要求?；瘜W(xué)指示卡應(yīng)在枯燥處保存,。遇潮會(huì)變色，影響滅菌作用的觀測(cè),。 

高壓蒸氣滅菌有必要使蒸氣順利進(jìn)入滅菌器內(nèi),，與滅菌物品觸摸，并將原有的冷空氣排出方可到達(dá)滅菌的作用,。要進(jìn)行空載熱散布和滿載熱穿透力驗(yàn)證(滿載時(shí)不超越總體積的2/3),。二種驗(yàn)證各重復(fù)三次，共做六次,。5個(gè)點(diǎn)六次試驗(yàn)標(biāo)明溫度均在121℃,，化學(xué)指示卡變黑；程度與對(duì)照色共同,；培育基均未改變色彩,，闡明高壓蒸氣滅菌作用合格。 

高壓滅菌器歸于強(qiáng)檢儀器,，但強(qiáng)檢僅僅對(duì)儀器物理參數(shù)的查核,。所以做過(guò)強(qiáng)檢的滅菌器還有必要進(jìn)行滅菌作用的驗(yàn)證。一些單位常常疏忽了這個(gè)重要的問(wèn)題,。G內(nèi)市售的手提滅菌器,，往往儀器指針到達(dá)所需的溫度，但滅菌物品的實(shí)踐溫度卻未到達(dá)要求。導(dǎo)致滅菌物品不完全,，影響試驗(yàn)成果,。培育基滅菌不完全，影響培育基的運(yùn)用及成果判別,。因而高壓蒸氣滅菌器無(wú)菌作用的驗(yàn)證是一個(gè)有必要引起重視的問(wèn)題,。