1.高壓蒸汽滅菌
為濕熱滅菌方法的一種,。是微生物培養(yǎng)中**重要的滅菌方法,。這種滅菌方法是基于水在煮沸時(shí)所形成的蒸汽不能擴(kuò)散到外面去，而聚集在密封的容器中,，在密閉的情況下,，隨著水的煮沸,，蒸汽壓力升高，溫度也相應(yīng)增高,。(PV=nRT) 高壓蒸汽是**有效的滅菌法,，能迅速地達(dá)到完全徹底滅菌。一般在15磅/英寸2壓力下（121.6℃）,，15～30分鐘,，所有微生物包括芽孢在內(nèi)都可殺死。它適用于對(duì)一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌,。
進(jìn)行高壓蒸汽滅菌的容器是高壓蒸汽
滅菌鍋,。高壓蒸汽
滅菌鍋是一個(gè)能耐壓又可以密閉的金屬鍋，有立式與臥式兩種,。
可以用電熱,、煤氣、蒸汽等,。鍋上裝有壓力表,，有的還裝有溫度計(jì)，能及時(shí)了解鍋內(nèi)壓力及溫度,。鍋上還設(shè)有排氣口,，其作用是在密閉之前，利用蒸汽將鍋內(nèi)的冷空氣排凈,，另外還裝有安全活門,，如果壓力超過一定限度，活門即可自動(dòng)打開,，放出過多的蒸汽,。
2.干熱滅菌
微生物培養(yǎng)中常用的干熱滅菌是指熱空氣滅菌。一般在電烘箱中進(jìn)行,。干熱滅菌所需溫度較濕熱滅菌高,，時(shí)間也較濕熱滅菌長。這是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)在干燥無水的情況下不容易凝固,。一般須在160℃左右保持恒溫3～4小時(shí),，方能達(dá)到滅菌的目的。
干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌,，凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基,，都不能進(jìn)行干熱滅菌,。
3.間歇滅菌
各種微生物的營養(yǎng)體在100℃溫度下半小時(shí)即可被殺死。而其芽孢和孢子在這種條件下卻不會(huì)失去生活力,。間歇滅菌就是根據(jù)這一原理進(jìn)行的,。
間歇滅菌的方法是用100℃、30分鐘殺死培養(yǎng)基內(nèi)雜菌的營養(yǎng)體,，然后將這種含有芽孢和孢子的培養(yǎng)基在溫箱內(nèi)或室溫下放置24小時(shí),，使芽孢和孢子萌發(fā)成為營養(yǎng)體。這時(shí)再以100℃處理半小時(shí),，再放置24小時(shí),。如此連續(xù)滅菌3次，即可達(dá)到完全滅菌的目的,。
間歇滅菌通常在流動(dòng)蒸汽的
滅菌鍋中進(jìn)行,，也可用普通鋁鍋代替。這種滅菌方法多用于明膠,、牛乳等物質(zhì)的滅菌,，這類物質(zhì)在100℃以上的溫度下處理較長時(shí)間，會(huì)被破壞,，而用間歇滅菌法就既起到了殺菌作用,，又使被處理的物質(zhì)免遭破壞。
4.紫外線滅菌
紫外線殺菌力**強(qiáng)的是波長2650～2660Å(10-1nm)的部分,。無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌,。無菌室和緩沖間的照射時(shí)間為20～50分鐘（視房間大小而定），接種箱照射10～15分鐘即可,。
為了加強(qiáng)紫外線滅菌的效果,，在照射前，可在無菌室,、緩沖間或接種箱內(nèi)噴灑5%石炭酸，以使空氣中附著有微生物的塵埃降落,，同時(shí)也可以殺死一部分微生物,。無菌室的工作臺(tái)的臺(tái)面和椅子，可用2～3%的來蘇兒擦洗,。然后再照射紫外線,。由于紫外線對(duì)人體有傷害作用，所以人不要直視正在照射的紫外線燈,，也不要在照射情況下進(jìn)行工作,。
滅菌后，為了檢驗(yàn)紫外線的滅菌效果,，可以在無菌室,、緩沖間或接種箱內(nèi)放一套盛有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿,，將皿蓋打開5～10分鐘，蓋好后,，放入溫箱中培養(yǎng),。如果只有一、二個(gè)菌落,，可認(rèn)為滅菌效果良好,。如雜菌叢生。則需延長照射時(shí)間或同時(shí)加強(qiáng)其它滅菌措施,。
